在過去的2年時(shí)間里，mRNA疫苗因COVID-19大流行從默默無聞到一戰(zhàn)成名。2020年12月，輝瑞/BioNTech、莫德納的mRNA新冠疫苗相繼獲得緊急使用授權(quán)；近日，輝瑞與BioNTech又宣布，啟動(dòng)臨床研究評估基于奧密克戎的候選mRNA疫苗的安全性、耐受性和免疫原性。

作為疫苗界的“新興武器”，中國的國產(chǎn)mRNA新冠疫苗進(jìn)展一直備受關(guān)注，其背后的公司更在近兩年受到資本市場熱捧。近日，柳葉刀旗下開放獲取期刊《柳葉刀-微生物》（The Lancet Microbe）在線發(fā)表了由浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院傳染病診治國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室李蘭娟院士等人聯(lián)合完成的一項(xiàng)研究，題為“SARS-CoV-2 ARCoV mRNA疫苗在中國成人中的安全性和免疫原性：一項(xiàng)隨機(jī)、雙盲、安慰劑對照的1期臨床試驗(yàn)”（Safety and immunogenicity of the SARS-CoV-2 ARCoV mRNA vaccine in Chinese adults: a randomised, double-blind, placebo-controlled, phase 1 trial）。

2020年10月30日至2020年12月2日期間,研究團(tuán)隊(duì)在對120名參與者進(jìn)行了1期臨床試驗(yàn)，118人接種了間隔28天的兩劑疫苗。該mRNA疫苗由中國軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院（AMMS）、艾博生物和沃森生物共同開發(fā)的候選mRNA疫苗ARCoV，其編碼SARS-CoV-2刺突蛋白的受體結(jié)合域(RBD)作為抗原。

研究團(tuán)隊(duì)認(rèn)為，這項(xiàng)單中心、雙盲、隨機(jī)、安慰劑對照及劑量遞增的1期臨床試驗(yàn)顯示，ARCoV在5微克、10微克、15微克、20微克、25微克所有劑量下均顯示了安全性、良好耐受性及免疫原性。接種疫苗后56天內(nèi)未報(bào)告嚴(yán)重不良事件，大多數(shù)不良事件為輕度或中度。其中發(fā)熱是最常見的全身性不良反應(yīng)，出現(xiàn)頻率隨著劑量增加而增加。

研究團(tuán)隊(duì)提到，ARCoV具有良好的穩(wěn)定性，可在冷藏條件下儲(chǔ)存和運(yùn)輸，為公眾接種疫苗提供了極大的便利。目前正在進(jìn)行一項(xiàng)多區(qū)域的3期臨床試驗(yàn)，以測試ARCoV的有效性。

值得注意的是，在多種因素之下，這款疫苗的臨床進(jìn)展相對國外來說較為緩慢。除ARCoV處于3期臨床試驗(yàn)之外，國內(nèi)的斯微生物在河南開展2期mRNA疫苗臨床試驗(yàn)；2021年3月16日，麗凡達(dá)生物的新冠mRNA疫苗獲得NMPA核準(zhǔn)簽發(fā)的《藥物臨床試驗(yàn)批件》，成為繼艾博生物以及斯微生物之后的國產(chǎn)第三款mRNA新冠疫苗。

2021年11月29日，艾博生物宣布完成3億美元的C+輪融資。這輪新融資的3個(gè)月前，這家國內(nèi)的mRNA疫苗“明星”公司剛剛刷新了中國生物醫(yī)藥企業(yè)IPO前單筆融資的紀(jì)錄，宣布完成7.2美元（超45億人民幣）的C輪融資。

3級全身不良事件發(fā)熱

2020年6月，ARCoV正式通過國家藥品監(jiān)督管理局臨床試驗(yàn)批準(zhǔn)，成為國內(nèi)首個(gè)獲批開展臨床試驗(yàn)的mRNA疫苗。在此之前，國際上輝瑞/BioNTech開發(fā)的BNT162b2和莫德納開發(fā)的mRNA-1273已經(jīng)邁得更快。

論文中對上述兩款疫苗也進(jìn)行了點(diǎn)評，稱這兩款mRNA疫苗的3期臨床試驗(yàn)均顯示有效性超過了94%，而這兩款疫苗都選擇SARS-CoV-2全長刺突蛋白作為抗原。

研究團(tuán)隊(duì)提到，基于SARS-CoV-2刺突蛋白的受體結(jié)合域(RBD)已被確定在幫助冠狀病毒進(jìn)入人體細(xì)胞中發(fā)揮了關(guān)鍵作用，而此前的研究也顯示，RBD作為抗原用于SARS-CoV和MERS-CoV研究時(shí)可誘導(dǎo)強(qiáng)烈的體液和細(xì)胞免疫反應(yīng)。團(tuán)隊(duì)開發(fā)的候選mRNA疫苗ARCoV，也是編碼SARS-CoV-2的RBD作為抗原。

值得一提的是，輝瑞/BioNTech此前還設(shè)計(jì)了另一款mRNA疫苗BNT162b1，也是編碼SARS-CoV-2的RBD作為抗原，但最終放棄了這一路徑。此前發(fā)布的對比研究報(bào)告顯示，相比BNT162b1，BNT162b2的副作用更小、免疫原性中的T細(xì)胞反應(yīng)更為廣泛。

李蘭娟等人在論文中還提到，臨床前研究表明，在小鼠和非人類靈長類動(dòng)物中，用ARCoV進(jìn)行兩劑免疫，引發(fā)抗SARS-CoV-2的強(qiáng)效中和抗體以及輔助T細(xì)胞(Th1)反應(yīng)。此外，ARCoV是液體制劑，可在標(biāo)準(zhǔn)冷藏條件下(2℃-8°C)儲(chǔ)存，便于運(yùn)輸和使用。

1期臨床試驗(yàn)在浙江杭州樹蘭醫(yī)院展開，納入了18-59歲、SARS-CoV-2陰性的健康成年人，隨機(jī)分組接受肌肉注射疫苗或安慰劑。疫苗劑量為5微克、10微克、15微克、20微克、25微克，安慰劑組為生理鹽水，每組20名參與者，第0天和第28天注射到三角肌。所有參與者都接種了第一劑疫苗，118人接種了第二劑疫苗。

安全性方面數(shù)據(jù)顯示，接種后56天內(nèi)無嚴(yán)重不良事件報(bào)告，大多數(shù)不良事件為輕度或中度。第一劑或第二劑接種ARCoV后，報(bào)告的系統(tǒng)性不良事件的發(fā)生率相似。

第一劑或第二劑接種后7天的不良反應(yīng)和56天不良反應(yīng)。

不良事件的發(fā)生率為：5微克組60%、10微克組80%、15微克組95%、20微克組95%、25微克組100%，安慰劑組為5%。報(bào)告的最常見不良反應(yīng)為注射部位疼痛、發(fā)熱、頭痛、疲勞或不適、注射部位發(fā)紅、肌肉疼痛、注射部位硬化和瘙癢、關(guān)節(jié)疼痛、腹瀉和寒戰(zhàn)。研究團(tuán)隊(duì)稱，第一劑或第二劑接種后的不良事件是短暫的，通過簡單的標(biāo)準(zhǔn)藥物、護(hù)理處理，或自行解決。大多數(shù)報(bào)告的不良反應(yīng)嚴(yán)重程度為輕度或中度，約95%在第一劑或第二劑接種后的頭2天內(nèi)緩解，其余在5天內(nèi)緩解。只有1名參與者在注射部位出現(xiàn)3級疼痛。

需要值得關(guān)注的是3級全身性不良事件發(fā)熱。5微克組沒有報(bào)告3級發(fā)熱，而在10微克組20名參與者中有3人(15%)報(bào)告3級發(fā)熱。這一發(fā)生率隨劑量增加而增加，15微克組為30%、20微克組為35%、25微克組為38%。

第一劑或第二劑接種后14天主動(dòng)不良反應(yīng)和56天不良反應(yīng)。

研究團(tuán)隊(duì)在論文討論部分指出，ARCoV的3級發(fā)熱發(fā)生率與輝瑞/BioNTech的BNT162b1的試驗(yàn)結(jié)果相似。他們援引數(shù)據(jù)稱，在同一18-55歲成年人30微克組中，BNT162b1的3級發(fā)熱發(fā)生率差異也顯著，美國12名參與者中無1例(0%)，德國12名參與者中有1例(8%)，中國24例中有4例(17%)。他們認(rèn)為，這表明不同人群的耐受性不同。此外，兩種基于全長刺突蛋白的mRNA疫苗，mRNA-1273和BNT162b2的3級發(fā)熱發(fā)生率在1期和3期試驗(yàn)中也有所不同。

研究團(tuán)隊(duì)稱，ARCoV在大規(guī)模人群中的安全性正在調(diào)查中。以往的研究表明，高劑量時(shí)引起的全身不良事件更為頻繁和嚴(yán)重，這與他們獲得的數(shù)據(jù)一致。與此同時(shí)，有幾項(xiàng)研究報(bào)告了第二次接種后更頻繁和更嚴(yán)重的全身不良事件。不夠，這一發(fā)現(xiàn)在ARCoV中未被觀察到，第一次和第二次接種后不良事件的發(fā)生率相似。

免疫原性在5-15微克范圍內(nèi)呈劑量依賴性

在免疫原性方面，1期臨床試驗(yàn)給出了初步的數(shù)據(jù)。第一劑接種后28天，15 微克組和20 微克組只有少數(shù)參與者檢測到RBD特異性免疫球蛋白G（IgG）。第二劑接種后15天，大多數(shù)參與者中檢測到RBD特異性IgG抗體，血清陽轉(zhuǎn)率為：5微克組65%、10微克組90%、15微克組100%、20微克組85%、25微克組81%。

15微克組IgG抗體滴度在第二劑接種后第15天出現(xiàn)峰值，幾何平均滴度為2414.8個(gè)ELISA單位，其余4組疫苗組這一數(shù)值均低于15微克組。

對原始野生型假病毒的中和活性試驗(yàn)顯示，第一劑接種后，只有少數(shù)參與者產(chǎn)生低滴度的中和抗體，而第二劑接種后，大多數(shù)參與者產(chǎn)生了高滴度的抗SARS-CoV-2中和抗體。

研究團(tuán)隊(duì)稱，與偽病毒試驗(yàn)一致，ARCoV誘導(dǎo)了高濃度的抗活SARS-CoV-2的中和抗體。第二劑接種后15天，針對活SARS-CoV-2中和抗體的血清陽轉(zhuǎn)率為：5 微克組80%、10微克組90%、15微克組95%、20微克組95%、25微克組94%。第二劑接種后，所有疫苗組中SARS-CoV-2中和抗體的幾何平均滴度迅速增加。在第二劑接種后15天，15微克組檢測到針對活SARS-CoV-2中和抗體的峰值滴度，幾何平均滴度約為COVID-19康復(fù)患者組的2倍。

1期臨床試驗(yàn)中的ARCoV抗體和中和反應(yīng)。

最后，研究團(tuán)隊(duì)還使用從1期臨床試驗(yàn)參與者身上分離的外周血單個(gè)核細(xì)胞對SARS-CoV-2 RBD進(jìn)行了ELISpot檢測，評估ARCoV接種后參與者獲得的的SARS-CoV-2特異性T細(xì)胞應(yīng)答。

數(shù)據(jù)顯示，在第一劑接種后，每個(gè)疫苗組中只有一小部分參與者的IFN-γ表達(dá)細(xì)胞呈陽性。第二劑接種后，5-20微克組的所有參與者IFN-γ表達(dá)細(xì)胞均呈陽性，25微克組有1名參與者呈陰性。類似地，除25微克組中的1人外，所有參與者在第二劑接種后第7天IL-2表達(dá)細(xì)胞呈陽性。IFN-γ和IL -2表達(dá)細(xì)胞的平均值在第二次接種后15天保持不變。

研究團(tuán)隊(duì)總結(jié)稱，所有疫苗組的參與者在第二劑接種后都有較強(qiáng)的體液和細(xì)胞免疫。在5微克、10 微克和15微克組中，RBD特異性IgG、SARS-CoV-2活病毒中和抗體、IFN-γ和IL-2細(xì)胞因子的分泌均呈劑量依賴性。對于SARS-CoV-2活病毒中和抗體，15微克組的幾何平均滴度顯著高于5微克組和10微克組。

他們指出，ARCoV的免疫原性在5-15微克范圍內(nèi)呈劑量依賴性，但在20-25 微克范圍內(nèi)免疫原性無明顯改善，這與BNT162b1和BNT162b2相似。他們解釋稱，這種現(xiàn)象的潛在機(jī)制仍有待確定，可能部分與宿主先天和適應(yīng)性免疫應(yīng)答的失衡有關(guān)。

1期臨床試驗(yàn)中ARCoV誘導(dǎo)的特異性T細(xì)胞反應(yīng)。

他們尤其討論了一點(diǎn)，細(xì)胞免疫反應(yīng)在SARS-CoV-2感染中具有保護(hù)作用。目前基于mRNA的疫苗、腺病毒疫苗的臨床結(jié)果都顯示，疫苗在大多數(shù)參與者中誘導(dǎo)了強(qiáng)烈的Th1細(xì)胞應(yīng)答。

值得注意的是，接種疫苗的理想效果是誘導(dǎo)長期免疫。研究團(tuán)隊(duì)在論文中指出，此前有研究指出，之前關(guān)于SARS康復(fù)者的研究表明，感染11年之后，還能在患者體內(nèi)檢測到SARS特異性記憶T細(xì)胞。而對于SARS-CoV-2，也有越來越多的證據(jù)表明，T細(xì)胞也發(fā)揮著重要作用，在康復(fù)期患者中檢測到SARS-CoV-2特異性記憶T細(xì)胞。

他們指出，接種新冠疫苗的參與者中存在SARS-CoV-2特異性T細(xì)胞，“這是一個(gè)有希望的跡象，表明疫苗可能會(huì)產(chǎn)生免疫，但這些T細(xì)胞是否能提供長期的保護(hù)，還有待測試?！?/p>

研究團(tuán)隊(duì)也指出了這項(xiàng)研究的幾個(gè)局限性。首先，數(shù)據(jù)解釋基于小樣本量，更多來自2期和3期試驗(yàn)的數(shù)據(jù)將為評估ARCoV的安全性和有效性提供進(jìn)一步的數(shù)據(jù)。第二，該試驗(yàn)僅限于18-59歲的中國成人參與者，對老年人的試驗(yàn)正在進(jìn)行中。第三，ARCoV的長期安全性和耐受性以及引發(fā)的免疫反應(yīng)的持久性還有待評估。